Page 65 - 北京京煤集团总医院第十届·2022学术年会论文集
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北京京煤集团总医院                                              第十届·2022 学术年会论文集


                   资料与方法

                   一、资料:

                   1、一般材料

                       1.1 入选标准:1)、年龄≥18 岁;2)2014 年 1 月至 2020 年 01 月在我科就诊,既往经

                   职业病鉴定机构诊断煤工尘肺;3)、标本经病理确诊为原发性肺腺癌或者含有腺癌成分的
                   患者;4)、按照 TNM 分期为不能手术治疗的 III-IV 期,配合完善基因检测。5)、至少有

                                                                       [3]
                   一个可测量病灶作为靶病灶进行评效(RECIST1.1 标准) 。
                       1.2 排除标准:1)、临床资料不全;2)、经肺癌靶向治疗后或者合并其他部位肿瘤曾

                   经或正接受治疗。

                       1.3 入选病例均为男性,70 例,年龄 44-91 岁,71.43±10.89(岁);接尘时间 4-35 年,

                   20.87±7.40 年;无吸烟史 9 例,吸烟史 61 例。尘肺期别,壹期 15 例,贰期 50 例,叁期 5

                   例;分化程度:低分化 24 例,中分化 28 例,高分化 18 例。

                   2、检测方法:

                       2.1、两种方法,(1)第一种(2014.1-2016.12)有 36 例:ARMS、IHC 检测。2)第二

                   种(2017.01-2020.01)有 34 例:NGS 检测。

                       2.2、方法原理:(1)ARMS:患者石蜡包埋组织样本,提取总 DNA,应用 ARMS 法,

                   检测 EGFR、KRAS;ICH 检测 ALK 融合基因。(3)NGS:此从石蜡包埋组织中提取 DNA

                   的方法,主要包括脱蜡、消化和纯化等 3  个步骤。石蜡包埋组织经改良的蛋白酶 K  消化后,
                   去除福尔马林交联,提高 DNA  产量和纯度,QIAamp 层析柱中的硅胶能选择性结合 DNA

                                                                                [4]
                   而分离糖类和蛋白质,消除 PCR 抑制剂,使抽提的 DNA 纯度更高 。
                       2.3、样本类型:电子气管镜(24 例)、CT 引导下穿刺(36 例)、胸腔镜(4 例)、胸

                   腔积液(4 例),转移灶(2 例),包括新鲜组织、石蜡白片或蜡卷、蜡块、胸腔积液肿瘤

                   细胞。

                       3、基因检测范围:(1)ARMS:EGFR 包含  Exon-18 ( G719A、G719S、G719C)  、Exon-

                   19( 19-Del)  、Exon-20( 20-Ins、T790M、S768I)、Exon-21( L861Q、L858R),KRAS 基因外显

                   子 2 中第 12 密码子(G12D(35G>A)、G12A(35G>C)、G12V(35G>T))和 13 密码子

                   (G13D(38G>A))的四个热点突变位点,并与相应测序结果相比较;ICH:ALK 融合基因。

                   (2)NGS:肿瘤个体化用药指导检测探针对 ALK、BRAF、EGFR、ERBB2、KRAS、MEK1、

                   MET、NRAS、PIK3CA、RET、ROS1、TP53、VEGFA 13 个肺癌诊疗相关基因的热点突变

                   区域。

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